Социально-методический центр поддержки СО НКО Московской области

Как выступать публично: советы начинающим спикерам

От публичных выступлений IT-специалисту никуда не деться: презентовать свой проект команде, защитить идею на хакатоне, выступить на митапе или конференции. Те, у кого опыта выступлений нет или мало, часто сталкиваются с проблемами: не знают, как подготовить речь, как вести себя перед публикой, и переживают, что всё пойдет не так.

Бизнес-тренер и преподаватель ораторского мастерства Николай Вешта на летнем фестивале IT-компании ЕРАМ в Рязани провел мастер-класс, на котором поделился секретами подготовки к публичным выступлениям и дал советы, что делать, чтобы чувствовать себя увереннее. Мы записали за ним лайфхаки и делимся с вами.

---

Бояться выступать публично – это нормально

По данным разных исследований, стресс перед выступлениями испытывают от 75 до 90% людей, среди них — даже опытные спикеры. В медицине даже придумали термин, описывающий это состояние, – глоссофобия/пейрофобия, что переводится как «страх сцены». Среди его симптомов – учащенное сердцебиение, потливость, тремор губ, рук и ног, тошнота и зажатость голосовых связок.

Страх публичных выступлений идет из древности, когда люди жили общинами. Если кто-то провинился – его вызывали на совет племени, публично обвиняли, а тот пытался оправдаться. Это и были первые публичные выступления, и они заканчивались одинаково: человек погибал, потому что его не принимали и изгоняли из общины, а самостоятельно выжить он не мог. Прошли тысячелетия, но этот страх остался у людей на подсознательном уровне. Мы боимся быть не принятыми другими и из-за этого чувствуем себя неуверенно. У многих страх идет со школьных времен: например, ученик не готов, и его вызвали к доске. Он получает двойку и его публично осуждает учитель. Потерпев неудачу, школьник начинает бояться выступать перед классом, а этот страх затем переходит во взрослую жизнь.

Победить волнение перед публичными выступлениями поможет хорошая подготовка и практика.

Как подготовиться к выступлению?

Проверьте, насколько тема интересна. Поймите, что в ней нового и полезного для аудитории.

Проверьте, что в докладе нет непонятных для аудитории терминов. Если что-то нужно будет объяснять, подумайте, как будете это делать, какие примеры приведете.

Подумайте, чем будете разбавлять свое выступление: чтобы удержать внимание аудитории, раз в 20 минут стоит разряжать обстановку. Задайте залу вопрос, покажите видео. Дайте возможность слушателям самостоятельно что-то попробовать – зайти на сайт, понажимать кнопки – их заинтересованность только возрастет. Не бойтесь шутить или добавлять на слайды смешные картинки.

Не пытайтесь выучить свою речь наизусть и не читайте по бумажке. Как только вы опустите взгляд вниз, слушатели опустят его в телефоны. Пусть вашей подсказкой будут слайды.

Продумайте домашнее задание для слушателей. Желательно, чтобы сразу после вашего выступления люди могли начать следовать вашим советам или использовать те инструменты, о которых вы говорили.

Подготовьте Elevator Pitch – краткий рассказ о себе, который обычно длится не больше минуты. Расскажите о себе: кто вы, почему здесь стоите, о чем расскажете.

Не стесняйтесь шутить и рассказывать о себе интересные факты во время приветствия: помните, что первые 30 секунд выступления очень важны. Именно в это время у людей формируется первое впечатление, а произвести его дважды нельзя.

Отрепетируйте свою речь. Можете сделать это перед знакомыми, а если идете на IT-конференцию, позовите на репетицию коллег. После доклада пусть они зададут вам вопросы. С большой вероятностью, то, о чем вас спросят на репетиции, будет волновать людей и во время выступления. Так вы сможете подготовить ответы.

Проверьте, укладываетесь ли в тайминг. Помните, что если ваше выступление затянется, то доклад следующего спикера начнется позже, и вся конференция может пойти не по плану. Организаторам это вряд ли понравится.

Дайте публике узнать о вас перед выступлением. Предоставьте организаторам подробное и интересное описание доклада, пропишите, как вас представить. Посмотрите, по каким каналам распространяется информация, и, если она идет в соцсети, разрешайте отмечать себя в постах. Так аудитория сможет познакомиться с вами еще до выступления.

Перед выступлением как следует выспитесь. Помните, что лучше всего организм восстанавливается в промежутке с 23 до 8 часов. Желательно за час до сна отложить гаджеты и не сидеть за компьютером – свет от техники воздействует на нервы – от этого уснуть сложнее. Лучше почитайте книгу или послушайте что-нибудь.

Протестируйте технику: проверьте, что презентация запускается, ее хорошо видно на экране, что нормально работает звук, поговорите в микрофон.

Как бороться со стрессом перед выступлением?

Волнение перед публичной речью испытывают и новички, и профессионалы. Есть несколько приемов, чтобы побороть стресс.

Откажитесь от успокоительных и кофе. Они могут сделать вас сонным и вялым, или, наоборот, перевозбужденным.

Сделайте несколько физических упражнений. В ситуации опасности, как, например, перед выступлением, мозг начинает вырабатывать адреналин. Снизить его уровень поможет физическая нагрузка. Перед выступлением несколько раз присядьте или отожмитесь, попрыгайте на месте.

Визуализируйте отличное выступление. Представьте, что вы уже вышли на сцену, как отлично вы держитесь, как восхищаются вами люди в зале. Вы шутите, люди реагируют, у вас все получается.

Разговоритесь. Например, найдите в интернете цитату какого-нибудь известного человека и проговорите свое отношение к ней. Согласны вы или нет, и почему.

Найдите в зале знакомых. Как правило, те, кого мы знаем, реагируют на нас хорошо. В зале наверняка такие будут. В начале выступления можете смотреть на знакомых – вы увидите, что они положительно реагируют на ваши слова и немного успокоитесь. Затем переключайтесь на других зрителей.

Как вести себя во время публичного выступления

Итак, вы проверили технику, постарались снять стресс и через пару минут начнете выступать. Как вести себя во время доклада? Куда смотреть? Что делать, если люди начнут отвлекаться? Вот несколько советов:

Выпрямитесь. Один из признаков уверенного в себе человека – прямая спина.

Следите за голосом: это очень важный инструмент. Громко приветствуйте аудиторию, а затем говорите тише, чуть прибавляя звук на важных тезисах. Говорите не торопясь, как если бы вы беседовали с другом. Делайте паузы – если вы читаете доклад на одном дыхании, воспринимать его будет сложно.

Возьмите что-нибудь в руку – многим это помогает справиться с волнением. Это может быть маркер, ручка, кликер. Если знаете, что ваши руки от волнения хаотично двигаются во время выступления, используйте реквизит. Не держите предмет прямо перед собой двумя руками, не закрывайтесь от аудитории.

Смотрите людям в глаза и не забывайте про дальние ряды. Слушателям нравится, когда на них обращают внимание. Если вы смотрите вбок или в сторону, то людям начинает казаться, что они вам неинтересны, а значит и они могут не оказывать вам должного внимания. Если вы будете смотреть в глаза людям, они не будут общаться и отвлекаться.

То, что вас кто-то не слушает, это нормально. Если так случилось, не паникуйте и не принимайте это на свой счет. У слушателя может что-то болеть, или он не выспался, или его мысли заняты семейными или рабочими проблемами.

Что делать после выступления

Оцените свое выступление. Уложились ли вы в тайминг, как на вас реагировала публика, хорошо ли им было слышно, видно то, что на слайдах. Запомните, что было не так, чтобы не повторить ошибок. Поймите, что вы сделали хорошо, и похвалите себя за то, что получилось.

Запомните ваши ощущения после выступления — когда вас благодарили или вам, например, аплодировали. Обращайтесь к этой хорошей эмоции в следующий раз, когда будете готовиться к выступлению. Так вы будете меньше бояться.

Проанализируйте обратную связь от аудитории – спросите у коллег или знакомых, как вы держались, что можно было бы поправить, посмотрите, что пишут в комментариях в соцсетях или спросите у организаторов конференции или митапа.

Практикуйтесь! Страх перед публичными выступлениями отступает с опытом. Чем чаще вы это делаете, тем быстрее он уходит. Наращивайте масштабы: сегодня это комната на 20 человек, потом – конференц-зал на 200 слушателей. Поднимайте руку и высказывайтесь, готовьте доклады, не стесняйтесь говорить тосты на праздниках. Помните, что публичные выступления – это то, что точно вам пригодится. Этот навык очень поможет вам в карьере.

Что читать про публичные выступления:

• TED TALKS. Слова меняют мир: первое официальное руководство по публичным выступлениям
• Презентации в стиле TED. 9 приемов лучших в мире выступлений
• Мастерство презентации
• К выступлению готов! Презентационный конструктор
• Камасутра для оратора

Полномочий президента республики достаточно, чтобы он мог полноценно выступать как глава власти

Кандидатуру министра высокотехнологической промышленности, 62-летнего Ваагна Хачатряна выдвинула правящая фракция «Гражданский договор».

Голосование состоялось, но власть предпочла сегодня не оглашать его результаты, учитывая то обстоятельство, что только голосами правящей фракции кандидат не мог быть избран в первом туре. Будет второй тур выборов.

Ваагн Хачатрян — член правящей политической команды, с октября прошлого года в кабинете министров Никола Пашиняна он занимает должность министра технологической промышленности. В 1990-е годы, при президентстве Левона Тер-Петросяна, Хачатрян был мэром Еревана, депутатом парламента. С начала 2000-х он занимался гражданской и политической деятельностью, будучи также членом возглавляемого Тер-Петросяном Армянского национального конгресса.

Единственный кандидат в президенты был тронут тем, что удостоен этой чести. Свою речь он начал с благодарностей в адрес правящей силы.

В отличие от Армена Саркисяна, который после почти четырехлетнего пребывания на посту президента заявил, что «у президента нет необходимых инструментов для воздействия на внутриполитические и внешнеполитические процессы», Хачатрян считает предоставленные президенту Конституцией полномочия достаточными для того, чтобы быть главой государства.

«Полномочий президента республики в рамках этой Конституции достаточно для того, чтобы он в полной мере выступал в качестве главы власти», — сказал Хачатрян.

Он считает, что президент должен стать непосредственным участником реализации программных позиций правительства.

Хачатрян также заявил, что в случае избрания поддержит объявленную властью мирную повестку. «У нас есть соседи, и мы должны уметь жить в мире с соседями», — сказал он.

Кандидат в президенты посчитал приоритетным вопрос безопасности страны. Он выразил мнение, что одной из миссий президента республики также является обеспечение солидарности.

Арсен Торосян из «Гражданского договора» задал вопрос, который оппозиция, не участвовавшая сегодня в обсуждении, поднимает регулярно — о том, будет ли Хачатрян президентом лишь правящей силы или всех граждан страны. «В конце концов, Вы собираетесь быть только нашим президентом или президентом всех граждан Республики Армения?» — спросил Торосян.

«Я уверен, что вы не хотите, чтобы я был только вашим президентом. И вы будьте уверены, что я не хочу быть только вашим президентом. Для сегодняшнего раздробленного общества, находящегося в тяжелом, не буду говорить политическом, но социально-экономическом положении, важно, чтобы работал именно институт президента, который является объединяющим», — в ответ сказал Ваагн Хачатрян.

Оппозиционные депутаты покинули зал заседаний в самом начале обсуждения, представив причины бойкота уже за переделами зала.

По словам главы фракции «Айастан» Сейрана Оганяна, они не хотели легитимировать данный процесс. «Участие оппозиции легитимирует очередной шаг, когда глава государства будет, подобно Национальному собранию, придатком исполнительной власти», — сказал он.

Арам Вардеванян из той же фракции также объяснил причины бойкота: «Мы не участвуем в этом процессе, потому что изначально выдвигают кандидата и говорят, что у них достаточно голосов, чтобы во втором туре избрать члена своей команды. А во-вторых, чтобы дать сигнал конкретно международному сообществу, прояснить им искаженные фактические обстоятельства, что политические процессы в Республике Армения не имеют ничего общего с какими-то демократическими бастионами».

Айк Мамиджанян представил аргументы фракции «Честь имею»: «Господин Хачатрян в эфире Общественного телевидения сказал буквально следующее: я член этой политической команды. Надпартийный арбитр, беспристрастность, сдержки-противовесы — все это забывается после этого предложения».

Оппозиционеры не исключили работы с президентом республики в некоторых ситуациях. А Хачатрян заявил, что постарается создать площадку для политического диалога, готов встретиться с оппозицией. Однако перед выборами Хачатрян не стал инициировать встречу с оппозицией.

Правящее большинство интересовало мнение Хачатряна об отсутствии оппозиции на обсуждении и голосовании. Хачатрян разделяет мнение правящей фракции о том, что оппозиции не удалось сделать процесс нелегитимным. «Я ценю их поведение. Это политическая позиция. Этим шагом они, возможно, пытаются создать проблему нелегитимности власти. Но есть одно важное обстоятельство: в конце концов, сидящих здесь избрал народ», — сказал Хачатрян.

Власть ожидает от Хачатряна большего. Как сказал вице-спикер Рубен Рубинян, одной из важнейших задач его президентства будет приведение оппозиции в конструктивное поле, установление единства в обществе.

«В чем смысл этой пустоты — в физическом и содержательном смысле слова? А смысл, на мой взгляд, в следующем: наши оппозиционные коллеги просто не смогли найти альтернативного кандидата в президенты», — сказал Рубинян.

«Гражданский договор» ранее заявил, что Хачатрян будет избран единогласно, но с учетом сегодняшнего неучастия оппозиции в голосовании кандидат не мог быть избран президентом в первом туре. Для избрания в первом туре необходим был как минимум 81 голос, а у правящего большинства лишь 71 мандат.

Результаты сегодняшнего голосования будут объявлены завтра, а затем начнется второй тур выборов, в ходе которого Ваагн Хачатрян, по всей вероятности, будет избран президентом. Во втором туре для избрания нужны 65 голосов, которые правящая фракция может обеспечить без участия оппозиции.

ВЫСТУПАТЬ КАК МОЖНО ЧАЩЕ! — Клуб при Японском центре во Владивостоке

Как известно, человек боится смерти и публичных выступлений. Но если с первым страхом мы почти ничего поделать не можем, то со вторым вполне можем справиться и даже приручить его. Рецепт прост – надо выступать как можно чаще, а еще лучше на иностранном языке. Например, на японском во время традиционного конкурса выступлений на японском языке, проводимом Японским центром ежегодно в апреле в честь дня своего рождения.

Об этом говорил и МИЯМОТО Тадаси, член жюри, и хорошо знакомый 3 и 4 курсу сэнсэй: «Не будет хорошо сразу на 100%, не будет очень здорово и со второго раза, надо заниматься постоянно и постоянно участвовать в этом конкурсе. Это отличный шанс отшлифовать умение говорить. Постепенно у вас разовьется навык, но на это уйдет время». И это нормально, изучение языка – процесс больше похожий на работу часового механизма, надо найти свой ритм и, не сбиваясь, идти в нем, сделав частью своей жизни.

В этом году почти все наши предложения по темам («Мой иероглиф», «Книги в моей жизни», «К 100-летию анимэ») были решительно отодвинуты в сторону. Слушатели курсов выбрали в основном свободную тему и тему путешествия по Японии, плавно переходящую в свободную. Нам очень приятно, что вы проявили самостоятельность и индивидуальность. Много нового мы узнали о вас, о том, что вас волнует. Наш призыв делать простым текст для выступления, не был воспринят всерьез. Вы нам дали ясно понять, что у нас в этом году в группах учатся философы и ученые, путешественники-экстремалы и психологи. А они простых путей не ищут.

Пожалуй, вступление ЛЕОНОВА Н.С., которое искрилось жизнелюбием (в этом ему помогло видео с кошкой Вешкой, исполнявшей команду апорт как приличная собака), и выступление САВИЦКОГО Я.В. о способе курения японских служащих помогли разрядить напряженную обстановку волнения перед выступлением. Мы вас очень просим не переживать в следующий раз. Мы даже придумали способ вам помочь – надо проводить обязательную репетицию незадолго до самого конкурса. Мы готовы помочь вам в этом. Ну, и раз уж вы так полюбили свободную тему, оставим, пожалуй, ее одну, и, возможно, для первого курса сделаем дополнительно тему «Самопредставление». Нам понравилось знакомиться с вами таким образом.

К тому же умение представиться всегда может пригодиться для ведения т.н. вежливых ни к чему не обязывающих разговоров small talk — не все же время о погоде, можно и о себе рассказать. Фразы, которые вы заучили для выступления, о чем бы оно ни было, всегда пригодятся в дальнейших контактах с японскими друзьями и партнерами по бизнесу. Сразу спешу отметить, что у выступающих заметен прогресс в произношении. Думаю, это благодаря работе выступающих с АРАКАВА-сан, ваша идея записывать за ней текст и потом воспроизводить близко к ее манере произносить, дает плоды. Просьба тем не менее обращать внимание на то, что в японском языке нет правила безударных гласных – даже если гласная не стоит под ударением, она все равно произносится так, как есть.

В этом году мы, как вы заметили, разделили конкурс на две части: выступление начального уровня (это 1-й и 2-й курсы) отдельно от среднего (3-й и 4-й курсы) с высшим (5-й курс). Дело в том, что в этом году было много хороших выступлений с 1 курса – 14 человек. Первый курс нас очень порадовал своей решимостью, стресс на конкурсе позволяет надолго запомнить тот текст, который готовишь. Мы очень рекомендуем принимать участие в подобных мероприятиях особенно в начале обучения языку. Необходимо в своей голове создать крепкие нейронные связи. Это можно сделать ежедневным трудом или стрессовой ситуацией.

Мы поздравляем на первом курсе с победой ЗАРЕЧНЕВУ Т.А., она заняла первое место с выступлением о ДВ кухне; второе – ЛЫСЕНКО А.В., третье место заняла ОХОТНИКОВА Е.Е., спецприз присудили А.С. КОЗЛОВОЙ. На втором курсе победила Н.А. НАГОРНАЯ с выступлением о красотах горы Татеяма в префектуре Тояма. Выступление старших групп началось с АНИСИМОВА С.В., он и стал победителем среди 3 и 4 курсов, тема его выступления была посвящена японским технологиям – не только роботы, но и искусственный интеллект на службе шоу-бизнеса; на пятом курсе лучшей стала Е.В. ШУЛЬГИНА, поделившись с нами опытом рисования.

В жюри в этом году помимо МИЯМОТО Тадаси работал КАГЭЯМА Кота, вице-консул Генерального консульства Японии в г. Владивостоке, СЕЛИВАНОВ Александр Юрьевич, помощник руководителя российского направления Медцентра «Хокуто», председателем жюри традиционно является директор Японского центра – МУКАИ Кадзуёси. В этот раз у нас не было приза зрительским симпатий, но от Медцентра «Хокуто» был подарочный сертификат на одного выступающего от каждого курса – круг пациентов медцентра расширился на пятерых слушателей наших курсов.

Подводя итоги конкурса, МУКАИ-сан отметил волнение участников, ответственный подход и вдумчивые тексты выступлений. Жюри узнало много нового и интересного, и с надеждой, что в следующем году будет еще интереснее, директор пожелал всем слушателям курсов успехов в освоении японского языка. В следующем году у нас состоится Десятый конкурс выступлений на японском языке. В нашем московском головном офисе обсуждается возможность в будущем поощрить лучших поездкой в Москву вместе со слушателями курсов других японских центров, а всего их шесть на территории Российской Федерации.

Поздравляем всех с прошедшим днем рождения Японского центра!

Фото: Л.Коноплёва

Похожие записи:

• Восточные мудрость и красноречие продемонстрируют слушатели курсов Японского центра
  апреля, 20, 2011 | Наш город |
  В рамках празднования 15-летия Японского центра во Владивостоке состоится Третий конкурс выступлений на японском языке
  Владивосток, 20 апреля, PrimaMedia. Третий конкурс выступлений на японском языке среди слушателей курсов японского языка состоится во Владивостоке в ближайшую субботу. Организатором данного мероприятия выступает Японский центр во Владивостоке, сообщает РИА PrimaMedia.
  Весь апрель Японский центр посвящает празднованию своего 15-го
• АЙКИДО – ИМПУЛЬС К ИЗУЧЕНИЮ ЯПОНСКОГО ЯЗЫКА
  июня, 1, 2016 | БудоКурсы японского языка |
  ЧИСТЯКОВ Виталий Евгеньевич, Президент ОО «Федерация Айкидо Тендорю Приморского края», 3 дан айкидо Тендорю.
  Интерес к культуре Японии в моей жизни появился еще в далеком детстве, когда мне было 5 лет.

  (function(w,doc) {
  if (!w.__utlWdgt ) {
  w.__utlWdgt = true;
  var d = doc, s = d.createElement(‘script’), g = ‘getElementsByTagName’;

• РУССКО-ЯПОНСКИЙ КОНКУРС ХАЙКУ
  марта, 12, 2012 | Литература |
  Дорогие друзья! Префектура Акита и город Акита — побратим Владивостока – приглашают вас принять участие в российско-японском конкурсе хайку с 5 по 25 мая 2012 г. Тема конкурса: МОРЕ. Заявку с указанием информации об авторе и стихотворением необходимо направить с 5 по 25 мая (до 14:00 по японскому времени) по электронным адресам: [email protected] (г-н
• СЕМИНАР О ХАЙКУ: ТРУДНОСТИ ПЕРЕВОДА
  октября, 22, 2013 | Литература |
  12 октября 2013 г. Владивосток посетила «поэтическая» делегация из префектуры Акита с целью не дать ослабнуть узам дружбы, которым, к слову уже 20 лет, воодушевляя друг друга поэзией хайку. Если для нас конкурс хайку – это неординарное событие, то для японцев это почти «заурядная» игра разума, внимательности и настроения, которая происходит естественным образом под влиянием
• ДЕСЯТЫЙ ГОДОВОЙ СБОР СТАЖЕРОВ
  февраля, 12, 2018 | Ассоциация стажеров |
  сбор стажеров Японского центра во Владивостоке за 2017 год
  Традиционно в начале февраля мы ставим точку в стажировках за предыдущий год. Отчёты по свежим следам и презентация через некоторое время, когда улягутся эмоции, два разных продукта. Почему презентация так сильно отличается от отчетов — тому как минимум две причины: первая – некоторые стажеры по прошествии времени

Метаболиты, высвобождаемые из апоптотических клеток, действуют как тканевые мессенджеры

Abstract

Зависимый от каспазы апоптоз составляет приблизительно 90% гомеостатического оборота клеток в организме ¹ и регулирует воспаление, пролиферацию клеток и регенерацию тканей ^{2,3, 4} . Как апоптотические клетки опосредуют такие разнообразные эффекты, до конца не изучено. Здесь мы профилировали секретом апоптотического метаболита и определили его влияние на окрестности ткани. Мы показываем, что апоптотические лимфоциты и макрофаги выделяют специфические метаболиты, сохраняя при этом целостность своей мембраны. Подмножество этих метаболитов также является общим для различных первичных клеток и клеточных линий после индукции апоптоза различными стимулами. Механически, секретом метаболитов апоптоза происходит не просто из-за пассивного опорожнения клеточного содержимого, а представляет собой регулируемый процесс. Опосредованное каспазой открытие каналов паннексина 1 на плазматической мембране способствует высвобождению определенного подмножества метаболитов. Кроме того, некоторые метаболические пути продолжали оставаться активными во время апоптоза с высвобождением только избранных метаболитов из данного пути. Функционально секретом метаболита апоптоза индуцирует специфические генные программы в соседних здоровых клетках, включая подавление воспаления, пролиферацию клеток и заживление ран. Кроме того, смесь апоптотических метаболитов снижала тяжесть заболевания в мышиных моделях воспалительного артрита и отторжения трансплантата легких. Эти данные продвигают концепцию о том, что апоптотические клетки не являются инертными клетками, ожидающими удаления, а вместо этого выделяют метаболиты в качестве сигналов «прощай», чтобы активно модулировать результаты в тканях.

Это предварительный просмотр содержимого подписки, доступ через ваше учреждение

Соответствующие статьи

Статьи открытого доступа со ссылками на эту статью.

• Апоптотические коричневые адипоциты увеличивают расход энергии за счет внеклеточного инозина.

  • Бирте Ниманн
  • , Саския Хауфс-Брусберг
  •  … Александр Пфайфер

  Природа Открытый доступ 05 июля 2022 г.

• Эндотелиальные каналы паннексина-1 модулируют активацию макрофагов и гладкомышечных клеток при формировании аневризмы брюшной аорты

  • Аманда С. Филиберто
  • , Майкл Д. Спиноза
  •  … Ашиш К. Шарма

  Связь с природой Открытый доступ 21 марта 2022 г.

• Дефицит рубикона повышает чувствительность мышей к опосредованному ишемией-реперфузией повреждению почек, опосредованному киназным доменом смешанного происхождения (MLKL)

  • Вульф Тоннус
  • , Софи Лок
  •  … Андреас Линкерманн

  Гибель клеток и болезни Открытый доступ 14 марта 2022 г.

Варианты доступа

Подписаться на журнал

Получить полный доступ к журналу на 1 год

199,00 €

всего 3,90 € за выпуск

Подписаться

Расчет налогов будет завершен во время оформления заказа.

Купить статью

Получите ограниченный по времени или полный доступ к статье на ReadCube.

32,00 $

Купить

Все цены указаны без учета стоимости.

Рис. 1: Секретом консервативного метаболита из апоптотических клеток. Рис. 2: Активация PANX1 и продолжающаяся метаболическая активность умирающих клеток регулируют высвобождение метаболитов. Рис. 3: Метаболиты из апоптотических клеток влияют на генные программы в живых клетках. Рис. 4: PANX1-зависимое высвобождение метаболитов во время апоптоза модулирует экспрессию генов фагоцитов in vivo и может ослаблять воспаление.

Доступность данных

Данные секвенирования РНК были отправлены в Gene Expression Omnibus (GEO) под номером доступа GSE131906. Исходные данные для рис. 1–4 и расширенные данные рис. 1–10 прилагаются к бумаге. Другие данные, подтверждающие результаты этого исследования, можно получить у соответствующего автора по запросу.

Наличие кода

Код R, используемый для создания тепловых карт, графиков вулканов и биоинформатического анализа, можно получить у соответствующего автора по запросу.

Ссылки

1. Fuchs, Y. & Steller, H. Запрограммированная гибель клеток в развитии и болезнях животных.

   Cell 147 , 742–758 (2011).

   Артикул КАС Google ученый

2. «>

   Rothlin, C.V., Carrera-Silva, EA, Bosurgi, L. & Ghosh, S. Передача сигналов ТАМ-рецептора в иммунном гомеостазе. год. Ред. Иммунол . 33 , 355–391 (2015).

   Артикул КАС Google ученый

3. Линдстен, Т. и др. Комбинированные функции проапоптотических членов семейства Bcl-2 bak и bax необходимы для нормального развития множества тканей. Мол. Cell 6 , 1389–1399 (2000).

   Артикул КАС Google ученый

4. Грегори, К. Д. и Паунд, Дж. Д. Гибель клеток по соседству: прямые микроокружающие эффекты апоптоза в нормальных и опухолевых тканях.

   Дж. Патол . 223 , 178–195 (2011).

   Артикул КАС Google ученый

5. Ryoo, H. D., Gorenc, T. & Steller, H. Апоптотические клетки могут индуцировать компенсаторную пролиферацию клеток через сигнальные пути JNK и Wingless. Дев. Ячейка 7 , 491–501 (2004).

   Артикул КАС Google ученый

6. Ке, Ф. Ф. С. и др. Эмбриогенез и взрослая жизнь в отсутствие внутренних эффекторов апоптоза BAX, BAK и BOK. Cell 173 , 1217–1230.e17 (2018).

   Артикул КАС Google ученый

7. Медина, С. Б. и Равичандран, К. С. Не позволяйте смерти разлучить нас: сигналы «найди меня» в коммуникации между умирающими клетками и фагоцитами.

   Гибель клеток Отличие . 23 , 979–989 (2016).

   Артикул КАС Google ученый

8. Elliott, M. R. et al. Нуклеотиды, высвобождаемые апоптотическими клетками, действуют как сигнал «найди меня», чтобы способствовать фагоцитарному клиренсу. Природа 461 , 282–286 (2009).

   ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья КАС Google ученый

9. «>

   Van Opdenbosch, N. et al. Вовлечение каспазы-1 и индуцированная TLR экспрессия c-FLIP подавляют ASC/зависимый от каспазы-8 апоптоз с помощью сенсоров воспаления NLRP1b и NLRC4. Представитель ячейки . 21 , 3427–3444 (2017).

   Артикул КАС Google ученый

10. Чекени, Ф. Б. и др. Каналы паннексина 1 опосредуют высвобождение сигнала «найди меня» и проницаемость мембран во время апоптоза. Природа 467 , 863–867 (2010).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья КАС Google ученый

11. Poon, I.K.H. et al. Неожиданная связь между антибиотиком, каналами паннексина и апоптозом. Природа 507 , 329–334 (2014).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья КАС Google ученый

12. Good, M.E. et al. Каналы паннексина 1 как неожиданная новая мишень антигипертензивного препарата спиронолактона. Обр. Рез . 122 , 606–615 (2018).

    Артикул КАС Google ученый

13. Мадео, Ф., Айзенберг, Т., Пьетрокола, Ф. и Кремер, Г. Спермидин в норме и болезни. Science 359 , eaan2788 (2018).

    Артикул КАС Google ученый

14. Лю, Х. и др. Высвобождение PNPT1 из митохондрий во время апоптоза запускает распад поли(А)РНК. Cell 174 , 187–201.e12 (2018).

    Артикул КАС Google ученый

15. Мориока, С. и др. Эффе-роцитоз индуцирует новую программу SLC, способствующую поглощению глюкозы и высвобождению лактата. Природа 563 , 714–718 (2018).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья КАС Google ученый

16. Wang, Y. et al.

    Деление митохондрий способствует продолжающемуся клиренсу апоптотических клеток макрофагами. Cell 171 , 331–345.e22 (2017).

    Артикул КАС Google ученый

17. Перри, Дж. С. А. и др. Интерпретация апоптотического трупа как противовоспалительного включает в себя путь восприятия хлоридов. Нац. Клеточный Биол . 21 , 1532–1543 (2019).

    Артикул КАС Google ученый

18. Ипсейз, Н. и др. Ядерный рецептор Nr4a1 опосредует противовоспалительные эффекты апоптотических клеток. Дж. Иммунол . 192 , 4852–4858 (2014).

    Артикул КАС Google ученый

19. Chung, E.Y. et al. Экспрессия интерлейкина-10 в макрофагах при фагоцитозе апоптотических клеток опосредуется гомеодоменовыми белками Pbx1 и Prep-1. Иммунитет 27 , 952–964 (2007).

    Артикул КАС Google ученый

20. Зайсс, Д. М. В., Гаузе, В. К., Осборн, Л. К. и Артис, Д. Новые функции амфирегулина в управлении иммунитетом, воспалением и восстановлением тканей. Иммунитет 42 , 216–226 (2015).

    Артикул КАС Google ученый

21. Goessling, W. et al. Генетическое взаимодействие передачи сигналов PGE2 и Wnt регулирует спецификацию развития стволовых клеток и регенерацию. Cell 136 , 1136–1147 (2009).

    Артикул КАС Google ученый

22. Shayakul, C., Clémençon, B. & Hediger, M.A. Семейство переносчиков мочевины (SLC14): физиологические, патологические и структурные аспекты. Мол. Аспекты Мед . 34 , 313–322 (2013).

    Артикул КАС Google ученый

23. «>

    Jha, A.K. et al. Сетевая интеграция параллельных метаболических и транскрипционных данных выявляет метаболические модули, которые регулируют поляризацию макрофагов. Иммунитет 42 , 419–430 (2015).

    Артикул КАС Google ученый

24. Шер, Дж. У. и Пиллинджер, М. Х. Противовоспалительное действие простагландинов. Дж. Расследование. Мед . 57 , 703–708 (2009).

    Артикул КАС Google ученый

25. Корганов А.С. и др. От системной самореактивности Т-клеток до органоспецифического аутоиммунного заболевания через иммуноглобулины. Иммунитет 10 , 451–461 (1999).

    Артикул КАС Google ученый

26. Верас, Ф. П. и др. Фруктоза-1,6-бисфосфат, высокоэнергетический промежуточный продукт гликолиза, ослабляет экспериментальный артрит, активируя противовоспалительный аденозинергический путь. науч. Реп . 5 , 15171 (2015).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья КАС Google ученый

27. Крупник А.С. и др. Ортотопическая трансплантация легкого мыши как экспериментальная методология изучения биологии трансплантата и опухоли. Нац. Протоколы 4 , 86–93 (2009).

    Артикул КАС Google ученый

28. Stewart, S. et al. Пересмотр рабочей формулировки 1996 г. для стандартизации номенклатуры при диагностике отторжения легких. J. Трансплантация сердца и легких 26 , 1229–1242 (2007).

    Артикул Google ученый

29. Кусков В. и др. Органоспецифическое заболевание, спровоцированное системным аутоиммунитетом. Cell 87 , 811–822 (1996).

    Артикул КАС Google ученый

30. «>

    Evans, A.M., DeHaven, C.D., Barrett, T., Mitchell, M. & Milgram, E. Интегрированная нецелевая сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография/тандемная масс-спектрометрическая платформа с ионизацией электрораспылением для идентификации и относительного количественного определения малых молекулярное дополнение биологических систем. Анал. Химия . 81 , 6656–6667 (2009).

    Артикул КАС Google ученый

Ссылки на скачивание

Благодарности

Авторы благодарят сотрудников лаборатории Равичандран и членов исследовательской группы Pannexin в УФА за многочисленные обсуждения и критическое прочтение рукописи, а также М. Ламканфи за трансгенный препарат Nlrp1b . мышей. Эта работа поддерживается грантами K.S.R. от NHLBI (P01HL120840), NIGMS R35GM122542 и Центра очистки клеток/Медицинской школы Университета Вирджинии, а также награду Odysseus от FWO, Бельгия, грант EOS от FWO (3083753-DECODE) и NHLBI (P01HL120840) и NIAID (R21 AI139967 и R21 AI135455) до U. L. Дополнительная поддержка была получена в рамках гранта на обучение фармакологии NIH T32 (T32GM007055) (CBM и BB), стипендии Mark Foundation от Института исследования рака и K99 от NCI (для JSAP) и Японского фонда Канье (для SM). . Текущий адрес Джастина Перри: Иммунологическая программа, Мемориальный онкологический центр Слоана-Кеттеринга, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк. ВЕЧЕРА. поддерживается постдокторской стипендией FWO-Senior.

Информация об авторе

Примечания об авторе

1. Эти авторы внесли равный вклад: Парул Мехротра, Санья Аранджелович, Джастин Перри Аранджелович, Джастин С. А. Перри, Шо Мориока, Брэди Баррон, Скотт Ф. Уолк и Коди С. Равичандран

2. Кафедра микробиологии, иммунологии и биологии рака, Университет Вирджинии, Шарлоттсвилль, Вирджиния, США

   Christopher B. Medina, Sanja Arandjelovic, Justin S.A. Perry, Sho Morioka, Scott F. Walk, Ulrike Lorenz & Kodi S. Ravichandran

3. VIB/UGent Центр исследования воспаления, биомедицинская молекулярная биология, Гентский университет, Бельгия, Гентский университет

   Парул Мехротра и Коди С. Равичандран

4. Хирургический факультет Университета Вирджинии, Шарлоттсвилль, Вирджиния, США

   Ичжан Гуо и Александр С. Крупник

5. Кафедра фармакологии, Университет Вирджинии, Шарлотсвилль, Вирджиния, США

   Брейди Бэррон

6. Кафедра онкологии и VIB, KU Leuven, Левен, Бельгия

   Bart Ghesquière

Университет иммунологии 9000 Шарлоттсвилль, Вирджиния, США

Александр С. Крупник, Ульрике Лоренц и Коди С. Равичандран

Авторы

1. Кристофер Б. Медина

   Посмотреть публикации авторов

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

2. Parul Mehrotra

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

3. Sanja Arandjelovic

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

4. Justin S. A. Perry

   Посмотреть публикации автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

5. Yizhan Guo

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

6. Sho Morioka

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

7. Brady Barron

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Академия

8. Scott F. Walk

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

9. Bart Ghesquière

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

10. Александр С. Крупник

    Просмотр публикаций автора

    Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

11. Ульрике Лоренц

    Просмотр публикаций автора

    Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

12. Коди С. Равичандран

    Посмотреть публикации автора

    Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

Contributions

C.B.M. и KSR разработали эксперименты. C.B.M. провел большинство опытов. П.М.М. выполнили эксперименты по апоптозу макрофагов и отслеживанию полиаминов. С.А. и К.Б.М. провел эксперименты с артритом. J.S.A.P. помогли с биоинформационным анализом. Ю.Г. и попросить. помогал в экспериментах по пересадке легких. С.М., Б.Б. и С.В. предоставил экспериментальную экспертизу по нескольким конкретным экспериментам. Б.Г. помогали с масс-спектрометрией полиаминов и U.L. предоставили мышей и концептуальные советы. C.B.M. и KSR написали рукопись при участии соавторов.

Автор, ответственный за переписку

Переписка с Коди С. Равичандран.

Заявление об этике

Конкурирующие интересы

Авторы не заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Дополнительная информация

Информация о рецензировании Nature благодарит Симуса Мартина, Гэри Сьюздака и других анонимных рецензентов за их вклад в рецензирование этой работы.

Примечание издателя Springer Nature остается нейтральной в отношении юрисдикционных претензий в опубликованных картах и ​​институциональной принадлежности.

Дополнительные рисунки и таблицы

Дополнительные данные Рис. 1 Высвобождение метаболита из апоптотических клеток Jurkat.

a , клетки Jurkat подвергали апоптозу с помощью УФ-облучения. Окрашивание 7AAD и аннексином V (AV) использовали для определения процента живых (AV ^— 7AAD ^— ), апоптотических (AV ⁺ 7AAD ^— ) или некротические (AV ⁺ 7AAD ⁺ ) клетки через 4 ч. b , Количественный анализ апоптоза (вверху) и вторичного некроза (внизу) ( n  = 4). Данные средние ± стандартное отклонение. **** P  < 0,0001, непарный двусторонний критерий Стьюдента t . c , d , График вулкана ( c ) и тепловая карта ( d ) из нецелевого метаболомного анализа супернатантов Т-клеток Jurkat, представляющих статистически обогащенные или уменьшенные ( P  < 0,05, двусторонний двухобразный тест Уэлча t -тест) метаболитов в апоптотических супернатантах по сравнению с живыми супернатантами. Данные являются репрезентативными для четырех биологических повторов.

Источник данных

Дополнительные данные Рис. 2 Взаимные изменения метаболитов между апоптотическим супернатантом и осадком.

a , Тепловая карта, полученная из нецелевой метаболомики гранул Т-клеток Jurkat, представляющая статистически обогащенные или уменьшенные ( P  < 0,05, двусторонний двухвыборочный тест Уэлча t -тест) метаболитов в осадке апоптоза относительно осадка живых клеток ( n  = 4 биологически независимых образца). b , Двунаправленный график, представляющий 85 метаболитов, которые были статистически обогащены в апоптотическом супернатанте и одновременно снижены в осадке апоптотических клеток по сравнению с условиями живых клеток ( P  < 0,05, двусторонний двухсторонний образец Уэлча t -тест). Метаболиты были сгруппированы по метаболическим путям ( n  = 4 биологически независимых образца). c – f , Масс-спектрометрию использовали для определения относительного количества спермидина ( c ), инозина ( d ), УДФ-глюкозы ( e ) и AMP ( f ) в супернатантах и клеточные осадки из Т-клеток Jurkat в живых и апоптотических условиях ( n  = 4 биологически независимых образца). * P  = 0,014, **** P  < 0,0001, непарный двусторонний Стьюдента t -тест. Данные средние ± стандартное отклонение.

Источник данных

Расширенные данные Рис. 3 Консервативное высвобождение метаболитов во время апоптоза.

a Масс-спектрометрию использовали для измерения концентрации пяти метаболитов, высвобождаемых во всех протестированных условиях и платформах, в живых или апоптотических супернатантах на миллион Т-клеток Jurkat или изолированных первичных тимоцитов (обратно рассчитано из общего количества использованных клеток). в экспериментальной установке) ( n  = 3). Метаболиты сгруппированы по метаболическим путям. Данные средние ± стандартное отклонение. * P  = 0,014, ** P  = 0,0014, *** P  = 0,0002, **** P  < 0,0001, непарный двусторонний критерий Стьюдента t -тест. b , Концентрацию АТФ, высвобождаемую в супернатанте в различных апоптотических клетках Jurkat, определяли с помощью анализа люциферазы ( n  = 4). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. **** P  < 0,0001, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции. c , Таблица с описанием различных типов клеток, апоптотических стимулов, методов и метаболитов, проверенных на нецелевые (более 3000 признаков или соединений) и целевые (116 метаболитов) метаболомики, включая АТФ, спермидин, глицерин-3-фосфат и креатин.

Источник данных

Расширенные данные Рис. 4 Активация и ингибирование PANX1 во время гибели клеток.

a , Вверху, репрезентативные гистограммы поглощения красителя TO-PRO-3 тимоцитами в различных условиях. Внизу: активация PANX1 в живых и апоптотических тимоцитах дикого типа ( Panx1 ^+/+ ) и мышей с нокаутом PANX1 ( Panx1 ^-/- ) по оценке с помощью проточной цитометрии путем измерения средней интенсивности флуоресценции поглощения красителя TO-PRO-3 ( n )  = 3 биологических повтора). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. **** P  < 0,0001, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции. b , Вверху, репрезентативные гистограммы поглощения красителя TO-PRO-3 клетками Jurkat в различных описанных условиях. Внизу: активация PANX1, оцененная с помощью проточной цитометрии поглощения красителя TO-PRO-3 в апоптотических клетках Jurkat дикого типа, клетках Jurkat, экспрессирующих мутантный PANX1-DN, и клетках Jurkat, обработанных ингибитором PANX1 спиронолактоном (50 мкМ) или тровафлоксацином ( 25 мкМ) ( n = 4 биологических повтора). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. **** P  < 0,0001, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции.

Источник данных

Расширенные данные Рис. 5 Ингибирование PANX1 не влияет на апоптозную гибель клеток.

a , контроль ( Panx1 ^+/+ ) или Panx1 ^-/- тимоцитов обрабатывали антителом против Fas0005 −1 ) в течение 1,5 ч. Клетки окрашивали 7AAD и аннексином V для определения процента живых, апоптотических или некротических клеток, как показано на рис. 1а с расширенными данными. b , Количественная оценка апоптоза (вверху) и вторичного некроза (внизу) контрольных и нокаутных по PANX1 тимоцитов ( n = 3). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. *** P  = 0,0004, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции. c , d , Количественная оценка апоптоза ( c ) и вторичный некроз ( d ) из клеток Jurkat перед метаболомным анализом ( n  = 4). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. **** P  < 0,0001, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции. и . Клетки окрашивали 7AAD и аннексином V для определения процента живых, апоптотических или некротических клеток.

Источник данных

Расширенные данные Рис. 6 PANX1-зависимое высвобождение метаболитов во время апоптоза.

a Масс-спектрометрию использовали для определения относительных количеств AMP, GMP, UDP-глюкозы и FBP в супернатантах Т-клеток Jurkat в различных условиях ( n  = 4). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. **** P  < 0,0001, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции. b , клетки Jurkat индуцировали для прохождения апоптоза путем обработки антителом против Fas (250 нг мл ^-1 ). Масс-спектрометрию использовали для измерения абсолютной концентрации на миллион клеток AMP (вверху), UDP-глюкозы (в центре) и FBP (F-1,6-BP) (внизу) в супернатантах Т-клеток Jurkat в различных условиях (назад). -рассчитано из общего количества клеток, использованных в экспериментальной установке) ( n  = 3). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. * P  = 0,031, ** P  = 0,0013, **** P  < 0,0001, обычный односторонний ANOVA с тестом множественных сравнений Турции. c . Масс-спектрометрию использовали для определения концентраций AMP, GMP, UDP-глюкозы и FBP на миллион клеток (обратно рассчитанных по общему количеству клеток, использованных в экспериментальной установке) в супернатанте изолированных первичных тимоцитов в различных условиях ( n  = 3). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. **** P  < 0,0001, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции. d , e , Относительные концентрации инозина ( d ) и холина ( e ) в живых, апоптотических или апоптотических супернатантах, в которых ингибировался PANX1, определяли с помощью масс-спектрометрии ( n0  =). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. **** P  < 0,0001, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции.

Источник данных

Расширенные данные Рис. 7 Консервативный секретом PANX1.

a , Вверху, трехсторонняя диаграмма Венна, на которой сравниваются PANX1-зависимые метаболиты, высвобождаемые из апоптотических клеток в различных тестируемых условиях. Внизу таблица, показывающая относительную пиковую интенсивность (нецелевой метаболомик) или абсолютные концентрации (целевой метаболомик) в супернатанте указанных клеточных обработок и мышей с нокаутом. Н.Д., не определено.

Расширенные данные Рис. 8 Транскрипционные и метаболические изменения во время апоптоза.

a , Повторный анализ данных секвенирования РНК из апоптотических клеток ¹⁴ , демонстрирующий, что уровни мРНК SRM увеличиваются или сохраняются во время апоптоза. b , После индукции апоптоза ( n = 4) экспрессию мРНК SRM оценивали с течением времени относительно живых контролей ( n  = 5). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. ** P  = 0,007, двухфакторный дисперсионный анализ. c , Включение ¹³ С-меченого аргинина в промежуточный спермидин полиаминового пути и высвобождение из клеток Jurkat после апоптоза, а также его частичное восстановление ингибитором панкаспазы zVAD ( n  = 3). Данные средние ± стандартное отклонение. ** P  = 0,0088, непарный двусторонний критерий Стьюдента t .

Источник данных

Расширенные данные Рис. 9 Транскрипционные изменения окружающих фагоцитов, вызванные высвобождением PANX1-зависимого метаболита во время апоптоза.

a , Анализ основных компонентов (PC) данных секвенирования РНК в качестве статистики контроля качества ( n  = 4 биологических повтора). b Экспериментальная процедура описана на рис. 3d. КПЦР использовали для оценки изменений экспрессии генов в Ptgs2 (вверху), Sgk1 (в центре) и Slc14a1 (внизу) в фагоцитах после обработки супернатантами клеток Jurkat или клеток Jurkat, экспрессирующих DN-PANX1 ( n  = 7). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. Live-AC ** P  = 0,0074 (live-AC Sgk1 ), ** P  = 0,0031 (AC–AC Sgk1 ), **** P  < 0,0001, обычный односторонний ANOVA с тестом множественного сравнения Турции. c . Экспериментальная процедура описана на фиг. 3d, за исключением того, что перед обработкой клеток LR73 супернатантом супернатант фильтровали через фильтр 3 кДа для удаления крупных молекул. КПЦР использовали для оценки изменений экспрессии генов Sgk1 (вверху) и Slc14a1 (внизу) в фагоцитах после обработки супернатантами в определенных условиях ( n = 3). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. *** P  = 0,0001, **** P  < 0,0001, обычный однофакторный ANOVA с тестом множественных сравнений Турции.

Источник данных

Расширенные данные Рис. 10 Анализ гибели клеток тимуса in vivo и эффектов супернатантов при артрите.

a , Анализ популяций тимуса, использованных для экспериментальных данных на рис. 4а. После выделения тимуса популяцию CD11b ^— CD11c ^—, содержащую тимоциты, использовали для выделения мРНК для проверки эффективности удаления аллеля Panx1 . КПЦР-анализ Panx1 МРНК у контрольных мышей ( PANX1 ^FL/FL CD4-CRE ^-/- ) ( N = 6) или мыши, у которых Panx1 был выбит в Thymocyt (N = 6) или мыши, у которых Panx1 был выпущен ( N = 6) или мыши, у которых Panx1 ( N = 6) или мыши, у которых Panx1 ( N = 6) или мыши. Panx1 ^fl/fl Cd4-cre ^+/− ) ( n  = 7). CD11b ⁺ CD11c ⁺ миелоидные клетки, полученные из тимуса Panx1 ^fl/fl Cd4-cre ^+/- мышей анализировали на экспрессию Panx1 , чтобы продемонстрировать отсутствие делеции PANX1. Делеция PANX1 была удалена только из тимоцитов, но не из миелоидных клеток, которые не экспрессируют CD4. Данные средние ± стандартное отклонение. ** P  = 0,0015, непарный двусторонний критерий Стьюдента t . b , Репрезентативные графики проточной цитометрии, показывающие степень апоптоза, индуцированного дексаметазоном в контроле и Panx1 ^fl/fl CD4-Cre ⁺ мышей. После выделения тимуса клетки окрашивали 7AAD и аннексином V для определения процента живых, апоптотических или некротических клеток, как показано на рис. 1а с расширенными данными. C , Количественный анализ апоптоза (слева) и вторичного некроза (справа) CD11B ^— CD11C ^— популяции тимуса от Panx1 ^FL/FL CD4-CRE ^{– 9006 (PBS N} CD4-CRE ^– (PBS N CD4-CRE ^–

(PBS

N CD4-CRE –

(PBS

N CR4-CRE –

(PBS

N 6. = 4, Dex n  = 10) или Panx1 ^фл/фл CD4-Cre ⁺ (PBS n  = 3, Dex n  = 9) мышей, получавших PBS или дексаметазон. Данные средние ± стандартная ошибка среднего. **** P  < 0,0001, обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции. d , Репрезентативные графики проточной цитометрии, демонстрирующие чистоту популяции CD11b ⁺ CD11c ⁺ после магнитного разделения от различных мышей и условий обработки. e , Сравнение CD11b ⁺ CD11C ⁺ ячейки, выделенные в различных условиях ( CRE ^{-/ —} : PBS N = 4, DEX N = 7; CRE +/- 9006: PBS N  = 3, Dex n  = 6). Данные средние ± стандартная ошибка среднего. P  > 0,05 (н.с.), обычный однофакторный дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Турции. f , Апоптотические супернатанты облегчают артритное заболевание, вызванное сывороткой мышей KBx/N. Мышам C57BL/6J вводили сыворотку мышей K/BxN, чтобы вызвать артрит. В прямом эфире ( n  = 4) или апоптозный ( n  = 5) супернатант вводили в течение пяти дней после индукции артрита. Отек лапы измеряли штангенциркулем и сообщали о процентном изменении по сравнению с 0-м днем. Данные являются средними ± стандартная ошибка среднего. * P  = 0,0131, двухфакторный дисперсионный анализ.

Источник данных

Дополнительная информация

Дополнительная информация

Этот файл содержит Руководство по дополнительным файлам.

Сводка отчетов

41586_2020_2121_MOESM3_ESM.xlsx

Дополнительная таблица Дополнительная таблица 1: Высвобождение метаболита Jurkat UV . Список метаболитов, высвобождаемых после УФ-обработки клеток Jurkat, по сравнению с контрольными живыми клетками (n = 4). Двусторонний двухвыборочный t-критерий Уэлча.

41586_2020_2121_MOESM4_ESM.

xlsx

Дополнительная таблица Дополнительная таблица 2: Обогащение супернатанта метаболитом и уменьшение осадка . Список метаболитов, высвобождаемых после УФ-обработки клеток Jurkat по сравнению с контрольными живыми клетками (n = 4) и обратно уменьшающихся в клеточном осадке (n = 4).

Дополнительная таблица

Дополнительная таблица 3: Метаболиты HMT . Список метаболитов, отобранных в ходе целевого метаболомного анализа.

41586_2020_2121_MOESM6_ESM.pdf

Дополнительная таблица Дополнительная таблица 4: Таблица метаболитов, высвобождаемых Panx1-зависимым образом в результате нецелевого метаболизма Т-клеток Jurkat, подвергающихся апоптозу. Наряду с названием метаболита, размером метаболита (в дальтонах), зарядом и ссылкой на предыдущие исследования, в которых предпринимались попытки внеклеточной обработки конкретных метаболитов.

исходные данные

исходные данные Рис. 1

ИСТОЧНИКИ ДАННЫЕ РИСУНОК 2

ИСТОЧНИКА.

Рис. 3

ИССЛЕДОВАНИЯ. Рис. 4

Исходные данные. Рис. 1 Рис. 4

исходные данные Рис. 1 Рис. 4

исходные данные Рис. 1 Рис. 4

. Рис.

Исходные данные Расширенные данные Рис. 2

Исходные данные Расширенные данные Рис. 3

Исходные данные Расширенные данные Рис.0019

Расширенные данные исходных данных. Рис. 6

Расширенные данные исходных данных. Рис. 8

Расширенные данные исходных данных. Рис.

Расширенные данные. Рис. 10

и разрешения.

Перепечатка и разрешения

Об этой статье

Дополнительная литература

• AcroBATics: как умирающие коричневые адипоциты вызывают потемнение

  • Юлия Циннгребе
  • Памела Фишер-Посовски

  Nature Reviews Endocrinology (2022)

• Иммуногенный клеточный стресс и гибель

  • Гвидо Кремер
  • Клаудия Галасси
  • Лоренцо Галлуцци

  Природа Иммунология (2022)

• Дефицит рубикона повышает чувствительность мышей к опосредованному ишемией-реперфузией повреждению почек, опосредованному киназным доменом смешанного происхождения (MLKL)

  • Вульф Тоннус
  • Софи Лок
  • Андреас Линкерманн

  Гибель клеток и болезни (2022)

• Медикаментозное лечение процесса эффероцитоза: концепции и возможности

  • Парул Мехротра
  • Коди С. Равичандран

  Nature Reviews Drug Discovery (2022)

• Апоптотические коричневые адипоциты увеличивают расход энергии за счет внеклеточного инозина.

  • Бирте Ниманн
  • Саския Хауфс-Брусберг
  • Александр Пфайфер

  Природа (2022)

Комментарии

Отправляя комментарий, вы соглашаетесь соблюдать наши Условия и Правила сообщества. Если вы обнаружите что-то оскорбительное или не соответствующее нашим условиям или правилам, отметьте это как неприемлемое.

Коммунальные услуги и поддержка для учащихся из США

Коммунальные услуги и поддержка для изучающих английский язык для американских студентов перейти к содержанию

act.org,actprofile.org,act.org,actstudent.org,act.alertline.com,services.actstudent.org,career4.successfactors.com,engage.act.org,discoveractaspire.org,qc.vantage.com ,myworkkeys.act.org,twitter.com,facebook.com,youtube.com,plus.google.com,linkedin.com,preview.act.org,workreadycommunities.org,pearson.com,instagram.com,actaspire.org ,run2.careerready101.com,run2.keytrain.com,leadershipblog.act.org

{{#каждое уведомление}}

{{/каждый}}

Отправить на утверждение

ACT обязуется предоставить соответствующие условия для экзаменуемых, сдающих тест ACT. Чтобы запросить приспособления, вам нужно будет работать с официальным лицом школы, потому что запрашиваемые приспособления должны основываться на приспособлениях, которые вы в настоящее время получаете в школе. Размещение ДОЛЖНО быть одобрено ACT до начала тестирования. Одного запроса недостаточно.

Все запросы, включая апелляции, должны подаваться опубликованным  поздний срок регистрации  на желаемую дату тестирования. Если ваш запрос не будет отправлен должным образом, он может не быть одобрен вовремя до выбранной вами даты тестирования.

Как сделать запрос

Не в школе?

Инструкции см. в разделе Экзаменуемые, обучающиеся на дому или незачисленные в настоящее время .

Зарегистрируйтесь для тестирования.

Войдите в MyACT и выполните следующие действия:

1. Привяжите действующую среднюю школу к своей учетной записи MyACT, прежде чем регистрировать , чтобы позволить ACT сообщить о вашей регистрации официальному лицу соответствующей школы в TAA. Рассмотрите возможность поиска своей средней школы по почтовому индексу, который может отличаться от вашего домашнего адреса.
2. Выберите «Да», когда будет предложено подтвердить, что вам нужны приспособления после начала процесса регистрации. Если вы выбрали «нет», вам нужно будет связаться с ACT как можно скорее, чтобы обновить свою регистрацию, если вам нужно пройти тестирование с приспособлениями.

Вы также можете просмотреть это полезное видео, в котором показано пошаговое руководство по процессу регистрации: Сравнение расширенного времени ACT и специального тестирования

Работайте с официальным представителем школы, чтобы подать запрос.

После регистрации вы получите электронное письмо, которое необходимо переслать официальному лицу школы. Вам также необходимо предоставить заполненную форму согласия на раскрытие информации в ACT (PDF) .

Должностное лицо вашей школы должно подать ваш запрос на размещение в TAA до крайнего срока поздней регистрации для вашего теста. После отправки заявки могут обрабатываться в течение 5–10 рабочих дней.

Нужна дополнительная помощь? Вы также можете просмотреть пошаговое видео: Итак, вы зарегистрировались для участия в ACT с приспособлениями, что теперь?

Примечание. Если необходимое вам жилье уже было одобрено ранее, вам не следует подавать новый запрос. Пропустить этот шаг.

Просмотрите уведомление о решении вместе с должностным лицом школы.

Представитель вашей школы получит копию уведомления о решении . Если ваш запрос был отклонен, просмотрите свое уведомление о решении у представителя школы. У вас есть время подать апелляцию до крайнего срока поздней регистрации .

Примечание. Если по истечении 10 рабочих дней вы не получили обновленную информацию от представителя вашей школы о статусе вашего запроса на размещение, свяжитесь с ними напрямую.

Утверждено для специальных испытаний? Договоритесь о тестировании!

Вы несете ответственность за работу с официальным представителем вашей школы, чтобы договориться о тестировании в рамках специального периода тестирования. Учащиеся, одобренные для специального тестирования, обычно проходят тестирование в своей школе. Если ваша средняя школа не может провести тест, свяжитесь с ACT как можно скорее.

Распечатайте входной билет.

Обязательно загрузите свою фотографию (если вы еще этого не сделали) и просмотрите свой входной билет, чтобы убедиться, что ваше размещение отражено в вашей регистрации. Если вы проходите тестирование в национальном центре тестирования, проверьте место проведения тестирования. Возможно, он был изменен, чтобы гарантировать, что ваше жилье может быть предоставлено.

Какая документация мне понадобится?

Политика ACT в отношении запроса приспособлений для теста ACT или  Политика ACT в отношении документации по поддержке учащихся, изучающих английский язык

Специальные тестовые окна

Если вы находитесь в США, на территориях США или в Пуэрто-Рико, во время указанных ниже периодов тестирования доступно специальное тестирование. Обратите внимание, что некоторые школы могут быть закрыты во время тестового окна из-за того, что школы не работают.

2022-2023 Специальное тестирование Windows

Дата тестирования	Тестовое окно
10 сентября 2022 г.	10 сентября — 25 сентября 2022 г.
22 октября 2022 г.	22 октября – 6 ноября 2022 г.
10 декабря 2022 г.	10 декабря — 25 декабря 2022 г.
11 февраля 2023 г.	11 февраля – 26 февраля 2023 г.
15 апреля 2023 г.	15 апреля – 30 апреля 2023 г.
10 июня 2023 г.	10 июня — 25 июня 2023 г.
15 июля 2023 г.*	15 июля — 30 июля 2023 г.

*Специальное тестирование недоступно в Нью-Йорке в период июльского окна тестирования.

Информационный выпуск для специального тестирования доступен в течение апрельского окна тестирования. Учить больше!

 

Дополнительные ресурсы

В зависимости от утвержденных условий проживания ACT направит вас на национальное или специальное тестирование.

Национальное тестирование

Некоторые приспособления (например, время и половина одного сеанса тестирования) и все виды поддержки EL могут быть предоставлены в национальных центрах тестирования. Если вы допущены к тестированию в национальном центре тестирования, вы увидите ярлык «Проживание» на входном билете после того, как ACT одобрит размещение и/или поддержку для учащихся, изучающих английский язык, и ваше место в национальном центре тестирования будет подтверждено в соответствующей комнате. тип (например, продленное время, одноместный номер).

Наверх

Специальное тестирование

Если утвержденные вами условия не могут быть предоставлены в национальном экзаменационном центре (например, многодневное тестирование), вы и представитель школы будете работать вместе, чтобы организовать тестирование в рамках соответствующего окна специального тестирования. Если вы получили разрешение на участие в специальном тестировании, вы увидите на своем входном билете пометку «Специальное тестирование» после утверждения условий проживания и/или поддержки учащихся, изучающих английский язык. Если ваша школа не может провести тест, вы можете найти другую школу и обратиться в ACT, чтобы запросить тестирование в этом месте. Свяжитесь с ACT , чтобы запросить форму изменения места тестирования.

Наверх

Отказ от размещения

Если вы получили разрешение на несколько вариантов размещения, ACT предоставит варианты размещения, которые обеспечивают наибольшее количество времени и поддержки. Если вы хотите использовать меньше приспособлений или вообще не использовать их при тестировании, свяжитесь с ACT более чем за 1 неделю до желаемой даты тестирования.

Если вы не получили одобрение на ваше приспособление, но хотите пройти тест без приспособлений, свяжитесь с ACT как можно скорее, чтобы обновить вашу регистрацию. Обратите внимание, что предпочитаемый вами центр тестирования может быть недоступен.

Наверх

Написание тестовых приспособлений

Если вы получили разрешение на размещение только для письменной секции и не зарегистрированы для прохождения письменного теста, вас переведут в национальный центр тестирования.

Наверх

Временные договоренности

Временные меры также доступны для ситуаций, включая, помимо прочего, перелом конечности. Свяжитесь с [email protected] для формы запроса.

Наверх

Документы и руководства

Допустимые приспособления ACT и поддержка для изучающих английский язык (EL) (PDF)	Предоставляет информацию о доступных приспособлениях и типах испытаний, в рамках которых они предоставляются (национальное или специальное тестирование)
Национальный и специальный (PDF)	Инфографика с подробным описанием примеров адаптации и поддержки EL в национальном и специальном тестировании.
Подготовка к тесту ACT — специальное тестирование (PDF)	Учебный ресурс для экзаменуемых, сдающих ACT посредством специального тестирования.
Руководство по поддержке специальных возможностей для ACT — Национальное и специальное тестирование (PDF)	Ресурс для испытуемых и образовательных групп, запрашивающих приспособления или поддержку EL для теста ACT.

Ваша конфиденциальность

ACT будет рассматривать всю информацию, предоставленную вами в поддержку вашего запроса, как конфиденциальную и будет использовать ее исключительно для определения вашего права на поддержку специальных возможностей. Подробная информация об этой поддержке будет предоставлена ​​только персоналу тестирования и не будет передана никому другому, включая выбранных вами получателей отчетов о результатах. Единственными исключениями являются те случаи, в которых связанные документы и информация обследуемого являются предметом повестки в суд или другого судебного приказа, или обязательного запроса от государственного органа. Отчеты об оценке ACT не содержат никаких подробностей о предоставляемой поддержке специальных возможностей.

Свяжитесь с нами

Если у вас есть более конкретный вопрос, воспользуйтесь формой обратной связи .

Остались вопросы?
Позвоните, чтобы поговорить с представителем ACT по телефону (319) 337-1332 , с понедельника по пятницу, с 8:00 до 17:00 (центрально)
Время ожидания вызова может варьироваться.

Ищете информацию для преподавателей о приспособлениях и поддержке для изучающих английский язык?

 

Это действие откроет новое окно. Вы хотите продолжить?

Если вы заходите на этот сайт из-за пределов США, Пуэрто-Рико или территорий США, перейдите на неамериканскую версию нашего веб-сайта.

Топ

Проглоченные двухцепочечные РНК могут действовать как видоспецифичные инсектициды

. 2009 ноябрь; 39 (11): 824-32.

doi: 10.1016/j.ibmb.2009.09.007. Электронная книга 2009 г.6 окт.

Стивен Уайярд ¹ , Адити Д. Сингх, Сильвия Вонг

принадлежность

• ¹ Факультет биологических наук Университета Манитобы, Виннипег, Манитоба, Канада. почемуард@cc.umanitoba.ca

• PMID: 19815067
• DOI: 10.1016/j.ibmb.2009.09.007

Стивен Уайярд и соавт. Насекомое Биохим Мол Биол. 2009 ноябрь

. 2009 ноябрь; 39 (11): 824-32.

doi: 10.1016/j.ibmb.2009.09.007. Epub 2009 6 октября.

Авторы

Стивен Уайярд ¹ , Адити Д. Сингх, Сильвия Вонг

принадлежность

• ¹ Факультет биологических наук Университета Манитобы, Виннипег, Манитоба, Канада. почемуард@cc.umanitoba.ca

• PMID: 19815067
• DOI: 10.1016/j.ibmb.2009.09.007

Абстрактный

Серьезным недостатком многих инсектицидов является то, что они могут убивать нецелевые виды. Чтобы решить эту проблему, мы использовали специфичность последовательности РНК-интерференции (РНКи) для разработки перорально доставляемых двухцепочечных (дц) РНК, которые избирательно убивали целевые виды. Плодовые мушки (Drosophila melanogaster), мучные жуки (Tribolium castaneum), гороховая тля (Acyrthosiphon pisum) и табачные роговые черви (Manduca sexta) были избирательно уничтожены при скармливании видоспецифичных дцРНК, нацеленных на транскрипты вАТФазы. Мы также продемонстрировали, что даже близкородственные виды могут быть избирательно уничтожены при питании dsRNAs, нацеленными на более вариабельные области генов, такие как 3′-нетранслируемые области (UTR): четыре вида рода Drosophila были избирательно уничтожены при питании короткими (UTR). <40 нуклеотидов) дцРНК, нацеленных на 3'-UTR гена гамма-тубулина. Для нимф тли и личинок жуков и мотыльков dsRNA можно просто растворить в их рационе, но для индукции RNAi у видов дрозофилид dsRNA необходимо инкапсулировать в липосомы, чтобы облегчить поглощение dsRNA. Это первая демонстрация РНК-интерференции после приема дцРНК у всех протестированных видов, и этот метод обещает как более высокую пропускную способность скрининга РНК-интерференции, так и разработку нового поколения видоспецифичных инсектицидов.

Похожие статьи

• Систематическое исследование эффектов РНК-интерференции и стабильности дцРНК в Tribolium castaneum и Acyrthosiphon pisum после инъекции и приема внутрь аналогичных дцРНК.

  Цао М., Гейтхаус Дж.А., Fitches EC. Цао М. и др. Int J Mol Sci. 4 апреля 2018 г.; 19(4):1079. дои: 10.3390/ijms1

  79. Int J Mol Sci. 2018. PMID: 29617308 Бесплатная статья ЧВК.

• Деградация дцРНК у гороховой тли (Acyrthosiphon pisum), связанная с отсутствием ответа при кормлении и инъекциях РНКи.

  Кристианс О., Свеверс Л., Смагге Г. Кристианс О и др. Пептиды. 2014 март; 53:307-14. doi: 10.1016/j.peptides.2013.12.014. Epub 2014 3 января. Пептиды. 2014. PMID: 24394433

• Нецелевые эффекты молекул дцРНК у полужесткокрылых насекомых.

  Арора А.К., Чанг С.Х., Дуглас А.Е. Арора А.К. и др. Гены (Базель). 2021 12 марта; 12 (3): 407. doi: 10.3390/genes12030407. Гены (Базель). 2021. PMID: 33809132 Бесплатная статья ЧВК.

• Инсектицидная РНК-интерференция выходит за рамки длинных дцРНК.

  Флинт А.С. Флинт АС. Pest Manag Sci. 2021 май;77(5):2179-2187. doi: 10.1002/ps.6147. Epub 2020 4 ноября. Pest Manag Sci. 2021. PMID: 33078549 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

• Доставка дцРНК для РНКи у насекомых: обзор и будущие направления.

  Ю Н, Кристианс О, Лю Дж, Ню Дж, Каппель К, Качча С, Хувенн Х, Смагге Г. Ю Н и др. наук о насекомых. 2013 фев; 20(1):4-14. doi: 10.1111/j.1744-7917.2012.01534.x. Epub 2012 5 июля. наук о насекомых. 2013. PMID: 23955821 Обзор.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Пространственное распределение и удержание в сеянцах сосны лоблолли экзогенных дцРНК, применяемых через корни.

  Брэгг З., Риске Л.К. Брэгг З. и др. Int J Mol Sci. 2022 15 августа; 23 (16): 9167. дои: 10.3390/ijms23169167. Int J Mol Sci. 2022. PMID: 36012434 Бесплатная статья ЧВК.

• Оценка серьезности панинвазии американского вредителя винограда, способного подорвать мировой рынок вина.

  Huron NA, Behm JE, Helmus MR. Гурон Н.А. и соавт. коммун биол. 2022 4 июля; 5 (1): 655. doi: 10.1038/s42003-022-03580-w. коммун биол. 2022. PMID: 35788172 Бесплатная статья ЧВК.

• Защита двухцепочечной РНК через Комплексообразование с двойными гидрофильными блок-сополимерами: влияние длины нейтрального блока в биологически релевантных средах.

  Пагсли К.Э., Исаак Р.Е., Уоррен Н.Дж., Бехра Дж.С., Каппель К., Домингес-Эспиноса Р., Кайр О.Дж. Пагсли К.Э. и др. Биомакромолекулы. 2022 13 июня; 23 (6): 2362-2373. doi: 10.1021/acs.biomac.2c00136. Epub 2022 12 мая. Биомакромолекулы. 2022. PMID: 35549247 Бесплатная статья ЧВК.

• РНКи в Piezodorus guildinii (Hemiptera: Pentatomidae): сборка транскриптома для разработки стратегий борьбы с вредителями.